기니피그 간 효소를 혈청형으로 바꿀 수 있을까?

상세 설명

연구진은 황산나트륨 분획, 메탄올 침전, DEAE-셀룰로스 컬럼 크로마토그래피, 연속 자유 유동 전기영동, 폴리아크릴아미드 겔 전기영동을 이용해 기니피그 혈청 L-아스파라기나아제를 약 3,000배 정제했다. 정제된 효소의 전체 수율은 7%였다. 효소 단백질은 폴리아크릴아미드 겔 전기영동, 면역전기영동, 면역확산에서 각각 단일 순수 성분으로 나타났다.

파파인으로 소화하자 기니피그 간 L-아스파라기나아제가 기니피그 혈청형으로 전환됐다. 파파인으로 소화한 간 효소를 DEAE-셀룰로스 컬럼 크로마토그래피와 폴리아크릴아미드 겔 전기영동으로 정제한 후 측정한 비활성은 3,000배 정제한 혈청 효소의 비활성과 사실상 같았다. 파파인으로 소화한 아스파라기나아제와 기니피그 혈청 효소의 종양 억제 작용에는 정량적인 차이가 없었다.

두 효소는 DEAE-셀룰로스 컬럼에서 동일한 용출 양상을 보였고 폴리아크릴아미드 겔 전기영동에서도 이동도가 같았으며, 면역확산에서는 동일성 반응을 보였다. 두 효소 모두 폴리아크릴아미드 겔 전기영동 후 당단백질 염색에서 양성 반응을 보였다. 이런 유사성에도 파파인으로 소화한 간 효소와 혈청 효소는 완전히 동일하지 않았다. 아미노산 조성에 약간의 차이가 있었고 한천 겔에서의 전기영동 이동도도 달라 두 효소가 동등하지 않음을 보여줬다.